草魚養殖技術之出血病的診斷方法

1.根據癥狀及流行情況進行初步診斷 在根據癥狀及流行情況進行初步診斷時，必須注意以下區別：

(1)以腸出血為主的草魚出血病和細菌性腸炎病的區別 活檢時，前者的腸壁彈性較好，腸腔內黏液較少；病情嚴重時，腸腔內有大量紅細胞及成片脫落的上皮細胞。而后者的腸壁彈性較差，腸腔內黏液較多；病情嚴重時，腸腔內有大量黏液和壞死脫落的上皮細胞，紅細胞較少。

(2)草魚出血病和細菌性敗血癥的區別 前者主要危害草魚、青魚的魚種；后者則危害團頭魴、鯽、鰱、鳙、鱖、加州鱸、黃鱔、草魚、白鯧、銀鲴、大口鲇等多種淡水魚，且對魚種，食用魚均危害。

2.根據病理變化可做出進一步診斷 如患出血病的魚，小血管壁廣泛受損，形成微血栓，同時引起臟器組織梗死樣病變；在肝細胞等的胞漿內可以看到嗜酸性包涵體；超薄切片用透射電鏡觀察，在胞漿內可以看到球形病毒顆粒；血液中紅細胞數、血紅蛋白量及白細胞數均非常顯著地低于健康魚；白細胞血式小，淋巴細胞百分率十分顯著地低于健康魚，單核細胞百分率則非常顯著地高于健康魚；血清谷丙轉氨酶、異檸檬酸脫氫酶、乳酸脫氫酶活性增高；血清乳酸脫氫酶在近陰極處出現第六條區帶；血漿總蛋白、血清白蛋白、尿素氮、膽固醇均降低等。

3.免疫學診斷 最后確診需進行免疫學診斷，常用的免疫學診斷方法有：

(1)葡萄球菌A蛋白協同凝集試驗 楊廣智等1991年報道，該方法快速、特異、設備簡單，適合基層單位檢測。

(2)酶聯免疫吸附試驗(ELISA法) 閔淑琴等1986年報道，該方法靈敏、準確、特異，可用于做早期診斷。該方法的靈敏度至少比不連續對流免疫電泳法(DCIE)高400倍。中國科學院武漢病毒研究所已制成試劑盒，可供早期診斷用。

(3)斑點酶聯免疫吸附試驗(Dot—ELISA) 簡稱點酶法。邵健忠等1996年報道，該方法操作簡便，不需要特殊的酶標儀；靈敏度高，比葡萄球菌A蛋白協同凝集試驗的靈敏度高10倍，比常規酶聯免疫吸附試驗高20倍。在魚已帶毒，但尚未顯癥時即可檢出。可用于早期診斷、檢疫和病毒疫苗質量檢定，是適合基層單位的快速、準確和易行的檢測方法。

(4)逆轉錄聚合酶聯反應(RT—PCR) 王鐵輝等1997年報道，該方法是檢測草魚出血病靈敏(最小可檢測到0.1皮克病毒核酸，1皮克＝1×10-12克)、特異、快速而有效的方法，更適合于大批樣本的檢測。該法不僅能夠檢測發病期顯癥病魚體內的病毒，而且能夠檢測發病前期及發病后期外表正常的病毒攜帶魚中的病毒，預示可用于草魚出血病的早期診斷。

(5)免疫過氧化物酶技術 劉葒等1995年報道，該方法快速、簡便、靈敏度比較高，整個過程只需4-5小時。其特異性能滿足早期檢測和診斷的目的。

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