1、準備工作：將鑷子、EP管、槍頭等工具放入高壓滅菌鍋中進行殺菌。
2、消毒處理：用酒精對雙手和鑷子做消毒處理，隨即取出EP管放入試劑盒中。
3、放入菌種：用移液槍取出甘油，放入EP管，再將菌種放入管中。
4、低溫保存：蓋好蓋子，做好標注，將所有菌種裝入袋中，最后把袋子放在冰箱中保存。
一、甘油保藏菌種實驗過程
1、準備工作
準備好鑷子、EP管、槍頭等工具，再將它們放入高壓滅菌鍋中做殺菌處理。
2、消毒處理
在手上擦拭酒精，并對鑷子消毒，然后用鑷子取出10支EP管并放入試劑盒中。
3、放入菌種
用移液槍取出50%的甘油，然后放入EP管中，再取出菌種放入EP管。
4、低溫保存
蓋上蓋子，做好標注，再將所有菌種都裝入袋中（袋子也要做好標注），最后把袋子放入冰箱內保存，溫度控制在零下20℃。
二、甘油保藏菌種原理
1、保藏原理
甘油可以作為菌種的保護劑，在低溫冷凍的條件下，微生物的新陳代謝趨于停止，此時即可達到長期、有效地保藏菌種（溫度越低，保藏效果越好）。
2、注意事項
（1）應使用非選擇性的增菌培養基，因為微生物在選擇性培養基中生長時可能會丟失某些生物特性，而且保藏的菌種的生物特性可能和標準菌株的特性有所差異。
（2）菌液的濃度越大，菌種的保存時間越長。保藏細菌常使用菌液，保藏霉菌常使用無菌水或用生理鹽水制備成的孢子懸液。
（3）甘油的最終濃度為10-20%。甘油原液過于粘稠，需配制適宜的甘油水溶液，將菌懸液和甘油按照1：1的體積比例充分混勻，再分裝至經過滅菌處理的保藏管中，最后放入零下70-80℃的冰箱中保存。
（4）甘油適合中長期菌種保藏，保藏時間為2-4年左右。
