為了實(shí)現(xiàn)細(xì)胞可逆性永生化，研究人員設(shè)計(jì)了一個(gè)改進(jìn)的四環(huán)素誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)（Tet-on）有條件地調(diào)節(jié)人原代細(xì)胞端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶（hTERT）的異位表達(dá)。實(shí)現(xiàn)四環(huán)素誘導(dǎo)的hTERT基因，潮霉素抗性基因和所有的必需元素合并成一個(gè)單一的質(zhì)粒載體。綿羊胎兒成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)染進(jìn)載體并通過(guò)強(qiáng)力霉素誘導(dǎo)hTERT的表達(dá)獲得四個(gè)假定永生化細(xì)胞克隆。這些永生化細(xì)胞保持了正常核型，而且250天的連續(xù)培養(yǎng)后沒(méi)有表現(xiàn)出轉(zhuǎn)化的表型。
當(dāng)移除強(qiáng)力霉素時(shí)，hTERT的表達(dá)停止，永生化細(xì)胞恢復(fù)到正常的增殖狀態(tài)并經(jīng)歷有限的分裂后最終衰老。這一基于四環(huán)素誘導(dǎo)hTERT表達(dá)系統(tǒng)的質(zhì)粒可以應(yīng)用于動(dòng)物細(xì)胞可逆性永生化。
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