在南方，由于繁殖季節(jié)溫度相對偏高，會導致中國林蛙胚胎的生殖腺向雄性方向分化，導致雄性比例偏高，因此中國林蛙南方養(yǎng)殖的雌性化問題就顯得更加關鍵。
1.原理
中國林蛙在胚胎發(fā)育初期性腺并沒有分化，當胚胎發(fā)育到一定階段，其原生殖細胞向雌性和雄性兩個方向分化。中國林蛙胚胎的生殖腺由皮質、髓質和原生殖細胞三個主要部分組成。如果原生殖細胞進入生殖腺皮質部分，生殖腺向雌性方向分化；如果原生殖細胞進入生殖腺髓質部分，生殖腺則向雄性方向分化。在性腺分化的關鍵時期，通過激素誘導或改變環(huán)境溫度，均可促使其生殖腺向某一性別方向發(fā)育，并永久保持這一性別特征，而且不影響繁育后代。筆者在實驗中發(fā)現(xiàn)，在一定時期施加一定濃度的激素可以提高雌性中國林蛙的比例，一般可以達到70%～85%。在變態(tài)初期對幼蛙進行比較發(fā)現(xiàn)，施加性激素的中國林蛙明顯比沒有加性激素的中國林蛙強壯。
2.雌性誘變方法
目前中國林蛙雌性誘變的方法主要有兩種，一種是控溫法，另一種是性激素誘導法。其中控溫法比較安全，經濟實惠，但是不易操作，雌性誘變率不穩(wěn)定。與控溫法相比，激素誘導法比較容易操作，雌性誘變率又比較穩(wěn)定，但是從長遠考慮，激素誘導法對中國林蛙的品質可能會造成影響。
(1)控溫法：即通過控制蝌蚪養(yǎng)殖期的水溫來調節(jié)中國林蛙雌性個體的比例。在中國林蛙生殖腺分化期間，溫度對生殖腺的分化發(fā)育的方向有明顯影響。溫度高，生殖腺向雄性分化發(fā)育的比例比較高；溫度低，生殖腺向雌性分化發(fā)育的比例較高。在蝌蚪生長發(fā)育期間，特別是在緩慢生長期和變態(tài)期，將日最高水溫控制在13～18℃，即可誘導生殖腺向雌性方向分化，達到提高雌性個體比例的目的，一般雌性個體可達70%左右。控溫法有以下幾種：
①調節(jié)水位和光照：調節(jié)水位和光照是控溫的有效手段，可以采取遮光、提高水位等措施來降低水溫以達到控溫要求。通過這種方法可以將水溫控制在高于日最低氣溫3～4℃的水平。
②調節(jié)產卵時間：通過人工催產來改變中國林蛙產卵時機，讓中國林蛙提前產卵，具體產卵時間可以根據(jù)當?shù)氐臍夂驐l件而定。在江南一帶，一般4月上旬以前水溫很少超過20℃，因此可以通過人工調控，讓中國林蛙2月份產卵，3～4月份變態(tài)，以充分利用自然的溫度條件進行雌性誘導。
③用深井水降溫：在蝌蚪期進行性誘變時，如水溫超過20℃，有條件的可利用深井水來降溫。白天水溫高時不斷加入井水并排出池水，即可達到降溫的目的。利用井水時，最好事先對井水進行檢測，以確保蝌蚪安全。
（2）激素誘導法：即利用雌性激素來誘導中國林蛙的生殖腺向雌性方向分化發(fā)育。雌性激素屬于固醇類激素，不溶于水，因此用藥時要用酒精來溶解。另外激素的作用效力很高，在用藥時一定要注意用藥量，用藥量過大會導致中國林蛙發(fā)育畸形。
①用藥時機：在中國林蛙的卵團胚胎發(fā)育至尾芽期生長過程中開始用藥。
②藥物：雌性激素類藥物種類很多，有雌二醇、雌三醇、雌酚片、雌烯酚、孕酮等多種，其中每一種又包括多種結構不同的成分，如雌二醇就有苯甲酸雌二醇、戊酸雌二醇、β-雌二醇等多種。因此在選擇雌性誘變劑時要科學合理，并非只要是雌性激素就可以使用。另外，近年來筆者在研究中發(fā)現(xiàn)，幾種雌性激素類藥物合理配比使用效果最佳。
③給藥方式
藥餌：尾芽期用藥后，到了蝌蚪取食期，也可將激素混拌到餌料中投喂。在制作藥餌時，要將藥物和餌料充分混合。另外要注意用藥量，過多會導致發(fā)育畸形，藥量不夠則起不到誘變的效果。
水體給藥：即將藥物溶解后直接噴灑到養(yǎng)殖池中。水體給藥法的吸收效果不如藥餌好，但是這種給藥方法藥效持續(xù)時間相對要長一些。
