
20世紀(jì)80年代中期,大連水產(chǎn)學(xué)院王子臣教授等為改變我國(guó)鮑經(jīng)過(guò)多年養(yǎng)殖品質(zhì)下降、病害頻發(fā)的狀況,采用生物、化學(xué)、物理等多種方法誘導(dǎo)鮑產(chǎn)生多倍體并獲得成功。目前鮑三倍體的誘導(dǎo)率可達(dá)67%,到2001年已生產(chǎn)數(shù)百億粒三倍體苗,在世界上率先實(shí)現(xiàn)了鮑多倍體苗種的規(guī)模化生產(chǎn)。同時(shí),鮑四倍體的誘導(dǎo)率業(yè)已達(dá)到50%。鮑的多倍體個(gè)體具有生長(zhǎng)速度快、抗病力強(qiáng)、個(gè)體大等優(yōu)點(diǎn),具有明顯的增產(chǎn)效果,極具推廣價(jià)值。下面筆者簡(jiǎn)略介紹一下獲得鮑多倍體的三種技術(shù)方法,供廣大養(yǎng)殖戶、特別是鮑育種生產(chǎn)戶參考。
1.水壓法
以皺紋盤(pán)鮑的受精卵為例:在卵受精后7分鐘及22分鐘用200千克/平方厘米的靜水壓力處理5分鐘,可分別獲得抑制第一極體釋出后形成的三倍體和抑制第二極體釋出后形成的三倍體,誘導(dǎo)率均在60%以上。應(yīng)注意:當(dāng)壓力大于400千克/平方厘米時(shí)受精卵的畸形率明顯增加,誘導(dǎo)效果不好,因此應(yīng)嚴(yán)格控制靜水壓力和加壓時(shí)間(壓力設(shè)備可聯(lián)系廠商購(gòu)買(mǎi))。
水壓法對(duì)胚胎有輕度的損傷,其缺點(diǎn)是需要專(zhuān)門(mén)的壓力設(shè)備,成本較高。
2.溫度法
低溫法以皺紋盤(pán)鮑為例:卵受精后12分鐘,在3℃水溫下浸泡受精卵15分鐘,可獲得抑制第一極體釋放后形成的三倍體;卵受精后32分鐘,在3℃水溫下浸泡受精卵15分鐘,可獲得抑制第二極體釋放后形成的三倍體。三倍體誘導(dǎo)率均可達(dá)70%~80%。
高溫法皺紋盤(pán)鮑的卵在受精后7分鐘用35℃的高溫水浸泡3分鐘,可獲得抑制第一極體釋放而形成的三倍體;受精后22分鐘可用35℃高溫水浸泡3分鐘,可獲得抑制第二極體釋放而形成的三倍體。兩者的誘導(dǎo)率分別可以達(dá)到50%~70%、60%~80%。
利用高溫或低溫均可抑制極體生成。本方法具有設(shè)備簡(jiǎn)單、成本低廉等優(yōu)點(diǎn),但受精卵對(duì)溫度休克較為敏感,成活率常偏低。
3.細(xì)胞松弛素B誘導(dǎo)法
本方法是目前海產(chǎn)貝類(lèi)多倍體培育最常用的方法之一,其誘導(dǎo)率較高,最高可達(dá)100%。其缺點(diǎn)是藥物價(jià)格昂貴,直接接觸對(duì)人體會(huì)產(chǎn)生毒副作用。細(xì)胞松弛素B的適宜溫度與水溫有關(guān)。對(duì)于皺紋盤(pán)鮑,在20℃水溫下的適宜濃度為1毫克/升~2毫克/升。受精卵經(jīng)細(xì)胞松弛素B浸泡處理后,還需要用0.01%的二甲亞礬溶液徹底清洗,洗滌時(shí)間30分鐘。誘導(dǎo)率可達(dá)到60.9%~81.0%。另外,還可用6-甲基氨基嘌呤、咖啡因等藥物浸泡受精卵,也可獲得多倍體。
總之,育種生產(chǎn)不是簡(jiǎn)單的換水與投餌的重復(fù),更不是投入與產(chǎn)出的迭加,它需要我們把握育種過(guò)程中每一個(gè)細(xì)節(jié),用心去觀察、去摸索、去研究。只要把握住了生產(chǎn)細(xì)節(jié),搞好鮑育種生產(chǎn)對(duì)每一個(gè)養(yǎng)殖戶來(lái)說(shuō)都不會(huì)是什么難事。